黑素細(xì)胞及其腫瘤

　　一、正常黑素細(xì)胞

　　人類黑素細(xì)胞主要分布于表皮基底層。表皮黑素細(xì)胞起源于神經(jīng)嵴。HE染色的切片中，黑素細(xì)胞核小濃染，胞漿透明，約10個(gè)基底細(xì)胞中可見(jiàn)一個(gè)。能確定黑素細(xì)胞的方法有透射電鏡觀察及多巴染色。免疫細(xì)胞化學(xué)染色目前僅以抗S-100蛋白抗體著染有一定參考意義，根據(jù)其位于基底層一般可判斷其系黑素細(xì)胞，但有時(shí)Langerhan氏細(xì)胞也可存在于基底層，而且我們?cè)趹?yīng)用中還發(fā)現(xiàn)，不少皮內(nèi)痣未累及表皮的黑素細(xì)胞作S-100蛋白染色時(shí)，表皮基底層未能顯示陽(yáng)性的黑素細(xì)胞。中間絲系列中，黑素細(xì)胞波形纖維蛋白陽(yáng)性。此外，黑素細(xì)胞尚可表達(dá)黑素小體相關(guān)抗原(HMSA)、一些神經(jīng)苷酯、P97等黑素瘤相關(guān)抗原，但極微弱。

　　二、色素痣

　　色素痣可表達(dá)與黑素細(xì)胞相同的抗原，且通常較強(qiáng)。1987年Nakanish等曾克隆出一析僅與色素痣而不與正常黑素細(xì)胞及黑素瘤細(xì)胞反應(yīng)的單抗TNKH1，由于未見(jiàn)進(jìn)一步的研究，尚不能認(rèn)為色素痣中存在一種特異抗原。

　　三、惡性黑素瘤

　　惡性黑素瘤主要起源于表皮黑素細(xì)胞，少數(shù)起源于色素痣、真皮等。在黑素細(xì)胞及其腫瘤中，表皮黑素細(xì)胞最為成熟，除分化抗原外，表達(dá)的抗原少，色素痣特別是交界痣處于較低的增殖狀態(tài)，表達(dá)的抗原較多，惡性黑素瘤分化最低，增生活躍，除能表達(dá)正常黑素細(xì)胞及痣細(xì)胞所表達(dá)的抗原外，尚能表達(dá)一些特殊的黑素瘤相關(guān)抗原，或表達(dá)強(qiáng)度遠(yuǎn)高于正常黑素細(xì)胞及痣細(xì)胞。

　　近10余年來(lái)，已克隆出許多株黑素瘤相關(guān)抗原的抗體，但至今尚未發(fā)現(xiàn)一種真正的黑素瘤特異抗原，有的單抗雖具有很高的特異性及敏感性，如兩伯稱2-139-1及6-26-3的單抗，黑素瘤陽(yáng)性率26/26，呈強(qiáng)陽(yáng)性或中度陽(yáng)性，22例色素痣僅1列交界痣可疑陽(yáng)性，然而近10年的文獻(xiàn)跟蹤未見(jiàn)進(jìn)一步的深入研究。

　　在眾多的黑素瘤相關(guān)抗原中，以P97、神經(jīng)節(jié) 苷酯、HMB45研究得較深入。診斷應(yīng)用中應(yīng)用最多的是HMB45,Gown等以ABC法觀察了60例惡性黑素瘤，僅2例陰性，交界部痣細(xì)胞陽(yáng)性6例，皮內(nèi)痣及30種168例非黑素細(xì)胞性腫瘤全部陰性。最近的免疫電鏡觀察顯示，HMB45抗原定位于黑素化不完全的黑素小體或稱異常黑素小體上。由于大樣本量的電鏡觀察發(fā)現(xiàn)少數(shù)先天性痣的皮內(nèi)痣中可以有異常黑素小體，另一方面少數(shù)黑素瘤中不一定存在異常黑素小體，所以應(yīng)用HMB45時(shí)，除需注意交界部的陽(yáng)性對(duì)黑素細(xì)胞腫瘤的良惡性鑒別無(wú)意義外，皮內(nèi)損害中的陽(yáng)性與陰性亦應(yīng)結(jié)合HE切片進(jìn)行分析。

　　神經(jīng)節(jié) 苷酯(Ganglioside)是一類帶唾液酸的鞘糖酯，按糖基中唾液酸的數(shù)目分為單、二、三、四唾液酸神經(jīng)節(jié) 苷酯，分別簡(jiǎn)稱GM、GD、GT和GQ，每種神經(jīng)節(jié) 苷酯還可根據(jù)薄板層析遷移率Rf值的大小再分幾個(gè)亞類，如GD1、GD2、GD3等。神經(jīng)組織、黑素細(xì)胞等含很微量神經(jīng)節(jié) 苷酯，細(xì)胞惡變過(guò)程中往往伴有神經(jīng)節(jié) 苷酯的改變，其改變程度與腫瘤的惡性程度和轉(zhuǎn)移有關(guān)。黑素瘤細(xì)胞表達(dá)大量GD3、GM3，25%原發(fā)和50%轉(zhuǎn)移性黑素瘤還表達(dá)GD2。研究表明，惡性黑素瘤與正常黑素細(xì)胞所表達(dá)的神經(jīng)節(jié) 苷酯的結(jié)構(gòu)是相同的，一些神經(jīng)節(jié) 酯的單抗只與黑素瘤結(jié)合，不與正常黑素細(xì)胞、神經(jīng)組織結(jié)合，可能是由于含量的差異所致，另外可能與神經(jīng)節(jié) 苷酯在細(xì)胞表面的暴露程度有關(guān)。GM3已被稱為黑素瘤的跨種抗原，但GD3較GM3更具特異性，因兩者在正常黑素細(xì)胞中的比值GM3：GD3為18：1，在黑素瘤中GM3：GD3為1：15。

　　目前針對(duì)神經(jīng)節(jié) 苷酯的單抗有數(shù)10株，各株的抗原結(jié)合特性有一定差異，較早的一株名為R24的抗原為GD3，除與黑素瘤、星形細(xì)胞瘤反應(yīng)外，與其它一些惡性腫瘤及少數(shù)正常組織亦有反應(yīng)。國(guó)內(nèi)引進(jìn)的一株名為Mel3的雜交瘤所針對(duì)的抗原為GD2、GT3、GD3、GQ16，10例黑素瘤組織細(xì)胞100%強(qiáng)陽(yáng)性或中度陽(yáng)性，4/7例色素痣的部分細(xì)胞弱陽(yáng)性或中度陽(yáng)性，4/14例表皮黑素細(xì)胞呈極弱反應(yīng)，胎肝以外的其它胚胎組織陰性。田芳等用該單抗所染結(jié)果與前述相類似。

　　P97抗原是一膜結(jié)合的轉(zhuǎn)鐵蛋白樣分子，黑素瘤細(xì)胞膜上含量很高?，F(xiàn)已克隆出P97分子cDNA并制備成分子疫苗，但應(yīng)用前景尚不明。對(duì)P97的研究主要是應(yīng)用放免法，很少應(yīng)用免疫組化方法。

　　S-100蛋白、波形纖維蛋白雖不象一些黑素瘤相關(guān)抗原那樣具有高特異性，但其應(yīng)用范圍廣，易獲得，所以此二種蛋白的抗體在黑素瘤鑒別診斷中應(yīng)用最普遍。我們對(duì)68例病理確診或疑診的黑素瘤組織進(jìn)行染色，結(jié)合抗角蛋白抗體標(biāo)染，HE切片觀察等，否定了11例的診斷，余57例S-100蛋白及波形纖維蛋白均陽(yáng)性。根據(jù)此觀察，筆者認(rèn)為：在HE切片觀察基礎(chǔ)上，排除一些神經(jīng)性腫瘤、組織細(xì)胞增生癥X、色素痣，S-100蛋白及波形纖維蛋白均陽(yáng)性，能肯定惡性黑素瘤診斷，兩抗體均陰性能否定診斷。

　　NSE在黑素瘤中的表達(dá)率較低，染色弱，在黑素瘤鑒別診斷中實(shí)用意義不大。

（大眾醫(yī)藥）